Статьи автора

Предварительное рентгеновское исследование кристаллов, полученных при сокристаллизации гипоксантин-гуанинфосфорибозилтрансферазы из <i>Escherichia coli</i> и производных пиразин-2-карбоксамида

Номер выпуска 6 от 14.09.2025

Создан высокоэффективный штамм-продуцент Escherichia coli C3030/pET23d⁺-EcHGPRT, позволяющий получать рекомбинантную гипоксантин-гуанинфосфорибозилтрансферазу из E. coli (EcHGPRT) в растворимой форме. Разработана методика выделения и очистки рекомбинантного белка. Определена удельная активность в отношении природного субстрата и производных пиразин-2-карбоксамида. Методом встречной диффузии в капилляре выращены кристаллы комплексов EcHGPRT с 3-гидроксипиразин-2-карбоксамидом (T-1105) и с 6-фтор-3-гидроксипиразин-2-карбоксамидом (T-705), пригодные для рентгеноструктурного исследования. Дифракционные наборы до разрешения соответственно 2.4 и 2.5 Å собраны на синхротроне ESRF (Франция, станция ID23-1) при температуре 100 K. Кристаллы относятся к пр. гр. P3(1)21, в независимой части ячейки содержатся две молекулы фермента.

9 0